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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
Data corrente: |
05/09/2019 |
Data da última atualização: |
18/11/2022 |
Tipo da produção científica: |
Artigo em Anais de Congresso |
Autoria: |
FERNANDES, M. V. M; QUINTAO, C. C. R.; P. M. M.; SARAIVA, N. Z.; CAMARGO, L. S. de A. |
Afiliação: |
Mariana Venturini Martins Fernandes, Unipac; CAROLINA CAPOBIANGO ROMANO QUINTAO, CNPGL; Michele Munk Pereira, UFJF; NAIARA ZOCCAL SARAIVA, CNPGL; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL. |
Título: |
Avaliação da complexação da proteína CAS9 e RNA-Guia com diferentes tipos de nanotubos de carbono visando à edição gênica em células e embriões de mamíferos. |
Ano de publicação: |
2019 |
Fonte/Imprenta: |
In: WORKSHOP DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE LEITE, 24., 2019, Juiz de Fora. Anais... Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 2019. |
Páginas: |
4 p. |
Idioma: |
Português |
Notas: |
Editor Técnico: Leônidas Paixão Passos, Embrapa Gado de Leite. |
Conteúdo: |
Resumo: Dentre as diversas aplicações dos nanomateriais, ressalta-se a utilização de nanotubos de carbono (NTC) como carreadores não virais de ácidos nucléicos e proteínas para o interior de células e embriões de mamíferos. Os métodos atualmente disponíveis para transfecção possuem limitações, o que estimula o desenvolvimento de métodos alternativos de carreamento de biomoléculas. O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência da complexação de dois tipos de NTCs, um carboxilado (MWNT-COOHs) e outro aminado (NTC- O-A), à proteína CAS9 e RNA-guia (sgRNA), para aplicações em edição gênica. Metodologia: Ambos os tipos de NTCs foram sintetizados por deposição química catalítica por vapor e caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após a síntese, os NTCs foram dispersos com auxílio de agitação ultrassônica (1 minuto), em meio Optimen e preparados de acordo com os seguintes grupos: G1: 0,2 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G2: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G3: 0,2 mcg/mcl NTC-O-A+CAS9+sgRNA; G4: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A+ CAS9+sgRNA; G5: CAS9+ sgRNA; G6: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH; G7: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A. A fim de se verificar a ocorrência de complexação do NTC com a proteína CAS9 e o sgRNA, foi avaliado o potencial zeta (PZ) de todos os tratamentos, através do equipamento Zetasizer Nano ZN (Malvern, Reino Unido). Resultados: As imagens obtidas pelo MET demonstraram morfologia típica dos nanotubos de carbono. Comparando os valores de PZ nos diferentes grupos, observou-se que o PZ de G6 (-15 mV) foi maior que o PZ de G1 (-4,83 mV) e G2 (-11,38 mV) após complexação, bem como o valor de G7 (13,9 mV) foi maior que o PZ de G3 (8,98) e G4 (8,92), sugerindo que pode ter ocorrido interação dos aminoácidos da proteína CAS9 com os grupamentos funcionais do MWNT-COOH e do NTC-O-A. Conclusão: Os resultados preliminares indicam uma possibilidade de interação entre os nanotubos de carbono avaliados com a proteína CAS9 e o sgRNA, sugerindo que esse nanomaterial possui potencial para aplicações na modificação genética de células e embriões. MenosResumo: Dentre as diversas aplicações dos nanomateriais, ressalta-se a utilização de nanotubos de carbono (NTC) como carreadores não virais de ácidos nucléicos e proteínas para o interior de células e embriões de mamíferos. Os métodos atualmente disponíveis para transfecção possuem limitações, o que estimula o desenvolvimento de métodos alternativos de carreamento de biomoléculas. O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência da complexação de dois tipos de NTCs, um carboxilado (MWNT-COOHs) e outro aminado (NTC- O-A), à proteína CAS9 e RNA-guia (sgRNA), para aplicações em edição gênica. Metodologia: Ambos os tipos de NTCs foram sintetizados por deposição química catalítica por vapor e caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após a síntese, os NTCs foram dispersos com auxílio de agitação ultrassônica (1 minuto), em meio Optimen e preparados de acordo com os seguintes grupos: G1: 0,2 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G2: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G3: 0,2 mcg/mcl NTC-O-A+CAS9+sgRNA; G4: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A+ CAS9+sgRNA; G5: CAS9+ sgRNA; G6: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH; G7: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A. A fim de se verificar a ocorrência de complexação do NTC com a proteína CAS9 e o sgRNA, foi avaliado o potencial zeta (PZ) de todos os tratamentos, através do equipamento Zetasizer Nano ZN (Malvern, Reino Unido). Resultados: As imagens obtidas pelo MET demonstraram morfologia típica dos nanotubos de carbono. Comparando os valores de PZ nos diferentes grupos, obs... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Complexação; Edição; Nanotubos. |
Categoria do assunto: |
H Saúde e Patologia |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/201674/1/17-Avaliacao-da-complexacao-da-proteina.pdf
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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URL |
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| Acesso ao texto completo restrito à biblioteca da Embrapa Semiárido. Para informações adicionais entre em contato com cpatsa.biblioteca@embrapa.br. |
Registro Completo
Biblioteca(s): |
Embrapa Semiárido. |
Data corrente: |
19/12/2016 |
Data da última atualização: |
16/01/2018 |
Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
Circulação/Nível: |
A - 2 |
Autoria: |
NOGUEIRA, D. M.; ESHTAEBA, A.; CAVALIERI, J.; FITZPATRICK, L. A.; GUMMOW, B.; BLACHE, D.; PARKER, A. J. |
Afiliação: |
DANIEL MAIA NOGUEIRA, CPATSA; AHMAD ESHTAEBA, College of Public Health, Medical and Veterinary Sciences, James Cook University, Townsville, Queensland, Australia; JOHN CAVALIERI, College of Public Health, Medical and Veterinary Sciences, James Cook University, Townsville, Queensland, Australia; LEE A. FITZPATRICK, College of Public Health, Medical and Veterinary Sciences, James Cook University, Townsville, Queensland, Australia; BRUCE GUMMOW, College of Public Health, Medical and Veterinary Sciences, James Cook University, Townsville, Queensland, Australia; DOMINIQUE BLACHE, School of Animal Biology/Institute of Agriculture, University of Western Australia, Crawley, Western Australia, Australia; ANTHONY J. PARKER, Department of Animal Science, The Ohio State University, Wooster, Ohio, USA. |
Título: |
Short-term supplementation with maize increases ovulation rate in goats when dietary metabolizable energy provides requirements for both maintenance and 1.5 times maintenance. |
Ano de publicação: |
2017 |
Fonte/Imprenta: |
Theriogenology, v. 89, p. 97-105, 2017. |
Idioma: |
Inglês |
Conteúdo: |
This study aimed to evaluate ovarian follicular dynamics in goats submitted to synchro-nization of estrus and supplemented with diets that differed in the metabolizable energy source and amount of energy. The experiment was carried out using 42 does allocated into three treatments, fed for 9 days with a ration providing 1.0 times maintenance containing maize (1 MM, n ¼ 14) or without maize (1 M, n ¼ 14) or a ration providing 1.5 times maintenance containing maize (1.5 MM, n ¼ 14). Estrus was synchronized with two injections of cloprostenol given 7 days apart. Does were also treated with intravaginal progesterone inserts and eCG. The number of ovulations and size of the follicles were measured using ultrasonography on Days 10, 11, and 12 after the start of the dietary treatment. The interval to estrus and duration of estrus did not differ between treatments (P¼ 0.382). Does fed with 1 and 1.5 MM had a similar number of ovulations but a greater number of ovulations than goats fed with 1 M (P ¼ 0.028). The mean number of small, medium, large, and total number of follicles on Days 10 to 12 of ultrasound evaluations did not differ (P ¼ 0.204) between treatments, but mean numbers changed over time (P < 0.001). The mean frequency and amplitude of LH pulses and concentrations of glucose, insulin, leptin, and insulin growth factor-1 in plasma were not significantly affected (P > 0.258) by any of the treatments. In summary, the inclusion of maize in the ration can stimulate ovulation rate at maintenance level. Similar results between groups fed diets that included maize and provided metabolizable energy at 1.0 and 1.5 maintenance demonstrate that to increase the ovulation rate when synchronizing estrous cycles in does, dietary supplementation with maize can be restricted to provide a maintenance level of metabolizable energy only, which would reduce dietary costs. MenosThis study aimed to evaluate ovarian follicular dynamics in goats submitted to synchro-nization of estrus and supplemented with diets that differed in the metabolizable energy source and amount of energy. The experiment was carried out using 42 does allocated into three treatments, fed for 9 days with a ration providing 1.0 times maintenance containing maize (1 MM, n ¼ 14) or without maize (1 M, n ¼ 14) or a ration providing 1.5 times maintenance containing maize (1.5 MM, n ¼ 14). Estrus was synchronized with two injections of cloprostenol given 7 days apart. Does were also treated with intravaginal progesterone inserts and eCG. The number of ovulations and size of the follicles were measured using ultrasonography on Days 10, 11, and 12 after the start of the dietary treatment. The interval to estrus and duration of estrus did not differ between treatments (P¼ 0.382). Does fed with 1 and 1.5 MM had a similar number of ovulations but a greater number of ovulations than goats fed with 1 M (P ¼ 0.028). The mean number of small, medium, large, and total number of follicles on Days 10 to 12 of ultrasound evaluations did not differ (P ¼ 0.204) between treatments, but mean numbers changed over time (P < 0.001). The mean frequency and amplitude of LH pulses and concentrations of glucose, insulin, leptin, and insulin growth factor-1 in plasma were not significantly affected (P > 0.258) by any of the treatments. In summary, the inclusion of maize in the ration can stimulate ovulation ... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Alimentação animal; Dinâmica folicular; Follicular dynamics. |
Thesagro: |
Cabra; Caprino; Milho; Ovulação; Produção animal; Reprodução. |
Thesaurus NAL: |
Breeding season; Goats; Reproduction. |
Categoria do assunto: |
L Ciência Animal e Produtos de Origem Animal |
Marc: |
LEADER 02887naa a2200337 a 4500 001 2058882 005 2018-01-16 008 2017 bl uuuu u00u1 u #d 100 1 $aNOGUEIRA, D. M. 245 $aShort-term supplementation with maize increases ovulation rate in goats when dietary metabolizable energy provides requirements for both maintenance and 1.5 times maintenance.$h[electronic resource] 260 $c2017 520 $aThis study aimed to evaluate ovarian follicular dynamics in goats submitted to synchro-nization of estrus and supplemented with diets that differed in the metabolizable energy source and amount of energy. The experiment was carried out using 42 does allocated into three treatments, fed for 9 days with a ration providing 1.0 times maintenance containing maize (1 MM, n ¼ 14) or without maize (1 M, n ¼ 14) or a ration providing 1.5 times maintenance containing maize (1.5 MM, n ¼ 14). Estrus was synchronized with two injections of cloprostenol given 7 days apart. Does were also treated with intravaginal progesterone inserts and eCG. The number of ovulations and size of the follicles were measured using ultrasonography on Days 10, 11, and 12 after the start of the dietary treatment. The interval to estrus and duration of estrus did not differ between treatments (P¼ 0.382). Does fed with 1 and 1.5 MM had a similar number of ovulations but a greater number of ovulations than goats fed with 1 M (P ¼ 0.028). The mean number of small, medium, large, and total number of follicles on Days 10 to 12 of ultrasound evaluations did not differ (P ¼ 0.204) between treatments, but mean numbers changed over time (P < 0.001). The mean frequency and amplitude of LH pulses and concentrations of glucose, insulin, leptin, and insulin growth factor-1 in plasma were not significantly affected (P > 0.258) by any of the treatments. In summary, the inclusion of maize in the ration can stimulate ovulation rate at maintenance level. Similar results between groups fed diets that included maize and provided metabolizable energy at 1.0 and 1.5 maintenance demonstrate that to increase the ovulation rate when synchronizing estrous cycles in does, dietary supplementation with maize can be restricted to provide a maintenance level of metabolizable energy only, which would reduce dietary costs. 650 $aBreeding season 650 $aGoats 650 $aReproduction 650 $aCabra 650 $aCaprino 650 $aMilho 650 $aOvulação 650 $aProdução animal 650 $aReprodução 653 $aAlimentação animal 653 $aDinâmica folicular 653 $aFollicular dynamics 700 1 $aESHTAEBA, A. 700 1 $aCAVALIERI, J. 700 1 $aFITZPATRICK, L. A. 700 1 $aGUMMOW, B. 700 1 $aBLACHE, D. 700 1 $aPARKER, A. J. 773 $tTheriogenology$gv. 89, p. 97-105, 2017.
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Registro original: |
Embrapa Semiárido (CPATSA) |
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